Van Gieson de acordo com Carleton’s Histological Technique
Reagentes e soluções
Nota: existem no mercado empresas que comercializam estas soluções já prontas a serem utilizadas, assim como kits de coloração completos.
Solução 1 – Solução de van Gieson
Solução saturada de ácido pícrico ………………………..…. 100 mL
Solução de fucsina ácida em água destilada a 1% ………. 5-10 mL
A proporção certa de fucsina ácida vai depender, em grande parte, da qualidade do corante.
OU
Solução 1 – Solução Unna’s (variante da solução de van Gieson)
Fucsina ácida ………… 0.25 g
Ácido nitrico ………….. 0.5 mL
Glicerina ………………. 10 mL
Água destilada ………. 90 mL
Ácido pícrico ………….. até ficar saturado
Esta solução proporciona um tom vermelho profundo ao colagénio e amarelo brilhante ao músculo.
Solução 2 – Hematoxilina férrica de Weigert’s
Solução A
Hematoxilina ………………. 1 g
Álcool absoluto ……………. 100 mL
A solução pode ser utilizada logo após ser efetuada.
Solução B
Solução de cloreto férrico aquoso a 30% …………..….. 4 mL
Ácido hidroclorídrico ………………………………………….. 1 mL
Água destilada ……………………………………………………. 95 mL
Para preparar a solução de trabalho de hematoxilina férrica de Weigert’s, adicionar partes iguais de solução e solução B.
Solução 3 – Celestine blue – haemalum
Celestine blue B ………………………… 0.5 g
Sulfato de amónio férrico …………… 5 g
Glicerina ………………………….………. 14 mL
Água destilada ………………………….. 100 mL
Dissolver o sulfato de amónio na água, sem calor. Adicionar o celestine blue e ferver durante 3 minutos. Filtrar depois de arrefecer e adicionar a glicerina. A solução deve manter-se estável durante pelo menos 6 meses.
Procedimento técnico
| 1 | Desparafinar e hidratar as lâminas até à água | ||
| 2 | Corar com hematoxilina férrica de Weigert ou celestine blue-haemalum | ||
| 3 | Lavar bem em água corrente e depois em água destilada | ||
| 4 | Corar com a solução de van Gieson | 2-5 min | |
| 5 | Lavar em água destilada ou passar diretamente para o passo seguinte* | ||
| 6 | Desidratar e clarificar | ||
| 7 | Montagem com meio de montagem sintético | ||
* Não lavar em água corrente alcalina, porque vai remover a coloração vermelha.
Resultados
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Referências bibliográficas
- Carleton, H.M., Drury, R.A.B. & Wallington, E.. A., 1976. Carleton’s Histological Technique. 4a., Oxford University Press.
