Carleton’s

Autor: Ruben Gouveia. Ver página autores.
Última edição: Pathologika, 12 de Novembro de 2017
Citar esta página: Gouveia, R., Histoquímica. Fontana Masson – Pathologika. Available at: https://pathologika.com/histoquimica/fontana-masson/carletons/ [Acedido: data].

Fontana Masson de acordo com Carleton’s Histological Technique


Reagentes e soluções

Nota: existem no mercado empresas que comercializam estas soluções já prontas a serem utilizadas, assim como kits de coloração completos.

Solução 1 – Nitrato de prata a 10%

Nitrato de prata …………………………………………… 10 g

Água destilada …………………………………………….. 100 mL

 

Solução 2 – Solução de trabalho de nitrato de prata para Fontana Masson

Nitrato de prata a 10% ………………………………………… 20 mL

Adicionar, gota a gota, amoníaco concentrado até a solução ficar turva e com ligeiro precipitado.

Adicionar 20 mL de água destilada e deixar repousar, preferencialmente de um dia para o outro.

Esta solução é melhor se for utilizada logo após o repouso, mas continua a dar bons resultados se ficar alguns dias numa garrafa escura.

 

Solução 3 – Solução de iodina de Gram

Cristais de iodina ….…………………….. 1 g

Iodeto de potássio ………………………. 2 g

Água destilada ……………………….…… 300 mL

Esta solução pode enfraquecer e perder a coloração após muitos meses.

 

Solução 4 – Solução stock de cloreto de ouro a 1%

Cloreto de ouro …………………………. 1 mL

Água destilada ………………………….. 99 mL

 

Solução 5 – Solução de trabalho de cloreto de ouro a 0,2%

Solução stock de cloreto de ouro a 1% ……. 10mL

Água destilada ……………….……………………. 40 mL

 

Solução 6 – Solução de tiossulfato de sódio a 5%

Tiossulfato de sódio ………………..…. 5 g

Água destilada ………………..…………. 100 mL

 

Solução 7 – Solução nuclear fast red (kernechtrot)

Fast red nuclear (kernechtrot) …………………. 0.5 g

Sulfato de alumínio ………………………..………. 25 g

Água destilada ………………………………………. 500 mL

Dissolver o sulfato de alumínio na água destilada e, de seguida, dissolver o fast red nuclear nesta solução utilizando calor. Arrefecer, filtrar e adicionar uns grãos de timol para preservar.

 

Procedimento técnico

 

1. Desparafinar e hidratar as lâminas até à água corrente
2. Tratar com iodina de Gram 10 min
3. Tiossulfato de sódio 2 min
4. Lavar em água destilada 3 x
5. Colocar as lâminas na solução de nitrato de prata para Fontana Masson, à temperatura ambiente e no escuro Durante a noite
6. Lavar em água destilada 3 x
7. Solução de trabalho de cloreto de ouro 3 min
8. Lavar em água destilada
9. Tiossulfato de sódio 2 min
10. Lavar em água corrente 2 min
11. Contrastar com nuclear fast red 2 min
12. Lavar em água corrente, desidratar, clarificar e aplicar lamela com meio de montagem sintético

 

Resultados

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Referências bibliográficas
  1. Carleton, H.M., Drury, R.A.B. & Wallington, E.. A., 1976. Carleton’s Histological Technique 4a., Oxford University Press.