Autor: Ruben Gouveia. Ver página autores. Última edição: Pathologika, 22 de Dezembro de 2019 Citar esta página: Gouveia, R., Histoquímica. Perl’s – Pathologika. Available at: https://pathologika.com/histoquimica/perls/afip/ [Acedido: data].
Perl’s de acordo com Armed Forces Institute of Pathology: Laboratory Methods in Histotechnology
Reagentes e soluções
Nota: existem no mercado empresas que comercializam estas soluções já prontas a serem utilizadas, assim como kits de coloração completos.
Solução 1 – Ácido hidroclorídrico a 20%
Ácido hidroclorídrico ……….. 20 mL
Água destilada ………………. 80 mL
Nota: Adicionar o ácido à água.
Solução 2 – Solução de stock de ferrocianeto de potássio a 10%
Ferrocianeto de potássio …………. 10 g
Água destilada …………………….. 100 mL
Solução 3 – Solução de trabalho de ferrocianeto de potássio-ácido hidroclorídrico
Partes iguais da solução 1 e 2. Preparar no momento da utilização.
Solução 4 – Solução nuclear fast red (kernechtrot)
Nuclear fast red (kernechtrot) …………………. 0.1 g
Solução de sulfato de alumínio a 5% …..…….. 100 mL
Aquecer devagar até ferver. Arrefecer, filtrar e adicionar um grão de timol como conservante.
Procedimento técnico
1. | Desparafinar e hidratar as lâminas até à água destilada | |
2. | Colocar as lâminas na solução de trabalho de ferrocianeto de potássio-ácido hidroclorídrico preparada recentemente | 30 min |
3. | Lavar em água destilada | |
4. | Contrastar com kernechtrot | 5 min |
5. | Lavar bem em água corrente | 2 min |
6. | Desidratar e clarificar | |
7. | Montar com meio de montagem sintético |
Resultados
Hemossiderina e alguns óxidos e sais de ferro …….. Azul
Núcleo e citoplasma ……………………………………………. Cor-de-rosa a vermelho