Bancroft’s

Autor: Ruben Gouveia. Ver página autores.
Última edição: Pathologika, 12 de Novembro de 2017
Citar esta página: Gouveia, R., Histoquímica. Fontana Masson – Pathologika. Available at: https://pathologika.com/histoquimica/fontana-masson/bancrofts/ [Acedido: data].

Fontana Masson de acordo com Bancroft’s Theory and Practice of Histological Techniques


Reagentes e soluções

Nota: existem no mercado empresas que comercializam estas soluções já prontas a serem utilizadas, assim como kits de coloração completos.

Solução 1 – Nitrato de prata a 10%

Nitrato de prata …………………………………………… 10 g

Água destilada …………………………………………….. 100 mL

 

Solução 2 – Solução de trabalho de nitrato de prata para Fontana Masson

Nitrato de prata a 10% ………………………………………… 20 mL

Adicionar, gota a gota, amoníaco concentrado ao nitrato de prata, agitando constantemente, até quase se dissolver o precipitado que se formou.

Esta titulação é fundamental para o método correr consistentemente bem. A titulação está terminada quando se vê uma opalescência fraca. Facilita se for utilizada luz refletida contra um fundo escuro.

Se for colocado demasiado amoníaco, adicionar umas gotas de nitrato de prata a 10% para restaurar a opalescência.

Adicionar 20 mL de água destilada e filtrar para frasco escura.

Armazenar a solução no frigorífico e utilizá-la num período de até quatro semanas.

 

Solução 3 – Solução de tiossulfato de sódio a 5%

Tiossulfato de sódio ………………..…. 5 g

Água destilada ………………..…………. 100 mL

 

Solução 4 – Solução nuclear fast red (kernechtrot)

Fast red nuclear (kernechtrot) …………………. 0.5 g

Sulfato de alumínio ………………………..………. 25 g

Água destilada ………………………………………. 500 mL

Dissolver o sulfato de alumínio na água destilada e, de seguida, dissolver o fast red nuclear nesta solução utilizando calor. Arrefecer, filtrar e adicionar uns grãos de timol para preservar.

 

Procedimento técnico

 

1. Desparafinar e hidratar as lâminas até à água destilada
2a. Colocar as lâminas na solução de trabalho de nitrato de prata na estufa a 56ºC 30-40 min
2b. Em alternativa, colocar as lâminas na solução de trabalho de nitrato de prata à temperatura ambiente Durante a noite
3. Lavar em água destilada 5 x
4. Tiossulfato de sódio 1 min
5. Lavar em água corrente 2-3 min
6. Contrastar com nuclear fast red 5 min
7. Lavar em água destilada
8. Desidratar e clarificar
9. Aplicar lamela com meio de montagem sintético

 

Resultados

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Referências bibliográficas
  1. Bancroft, J.D., Gamble, M. & Suvarna, S.K., 2012. Theory and Practice of Histological Techniques 7a., Elsevier Churchill Livingstone.