Fontana Masson de acordo com Armed Forces Institute of Pathology: Laboratory Methods in Histotechnology
Reagentes e soluções
Nota: existem no mercado empresas que comercializam estas soluções já prontas a serem utilizadas, assim como kits de coloração completos.
Solução 1 – Nitrato de prata a 10%
Nitrato de prata …………………………………………… 10 g
Água destilada …………………………………………….. 100 mL
Solução 2 – Solução stock de nitrato de prata para Fontana Masson
Nitrato de prata a 10% ………………………………………… 95 mL
Adicionar, gota a gota, hidróxido de amoníaco concentrado até desaparecer o precipitado que se forma.
Adicionar, gota a gota, nitrato de prata a 10% até a solução ficar ligeiramente turva.
Deixar repousar durante a noite antes de utilizar.
Solução 3 – Solução de trabalho de nitrato de prata para Fontana Masson
Solução stock de nitrato de prata para Fontana Masson ……. 25 mL
Água destilada ……………………………….……………………………… 75 mL
Filtrar antes de utilizar.
Solução 4 – Solução stock de cloreto de ouro a 1%
Cloreto de ouro …………………………. 1 mL
Água destilada ………………………….. 99 mL
Solução 5 – Solução de trabalho de cloreto de ouro a 0,2%
Solução stock de cloreto de ouro a 1% ……. 10mL
Água destilada ……………….……………………. 40 mL
Solução 6 – Solução de tiossulfato (hipo) de sódio a 5%
Tiossulfato (hipo) de sódio …………. 5 g
Água destilada ………………..…………. 100 mL
Solução 7 – Solução nuclear fast red (kernechtrot)
Fast red nuclear (kernechtrot) …………………. 0.1 g
Solução de sulfato de alumínio a 5% …..…….. 100 mL
Aquecer devagar até a ferver. Arrefecer, filtrar e adicionar um grão de timol como conservante.
Procedimento técnico
| 1. | Desparafinar e hidratar as lâminas até à água destilada | |
| 2. | Colocar as lâminas na solução de trabalho de prata Fontana e deixar na estufa a 37ºC | 60 min ou até o corte ficar castanho claro |
| 3. | Verificar as lâminas passados 45 minutos.Se as lâminas estiverem castanho claro, deixar fora da estufa durante 5 minutos. | |
| 4. | Lavar em água destilada | 3 x |
| 5. | Solução de trabalho de cloreto de ouro | 10 min |
| 6. | Lavar em água destilada | |
| 7. | Tiossulfato de sódio | 5 min |
| 8. | Lavar em água destilada | |
| 9. | Contrastar com solução de fast red | 5 min |
| 10. | Lavar abundantemente em água | |
| 11. | Desidratar e clarificar | |
| 12. | Aplicar lamela com meio de montagem sintético |
Resultados
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Referências bibliográficas
- Prophet, E.B. & Armed Forces Institute of Pathology, 1992. Laboratory Methods in Histotechnology. Washington, DC. American Registry of Pathology.
