AFIP

Autor: Ruben Gouveia. Ver página autores.
Última edição: Pathologika, 11 de Novembro de 2017
Citar esta página: Gouveia, R., Histoquímica. Fontana Masson – Pathologika. Available at: https://pathologika.com/histoquimica/fontana-masson/afip/ [Acedido: data].

Fontana Masson de acordo com Armed Forces Institute of Pathology: Laboratory Methods in Histotechnology


Reagentes e soluções

Nota: existem no mercado empresas que comercializam estas soluções já prontas a serem utilizadas, assim como kits de coloração completos.

Solução 1 – Nitrato de prata a 10%

Nitrato de prata …………………………………………… 10 g

Água destilada …………………………………………….. 100 mL

 

Solução 2 – Solução stock de nitrato de prata para Fontana Masson

Nitrato de prata a 10% ………………………………………… 95 mL

Adicionar, gota a gota, hidróxido de amoníaco concentrado até desaparecer o precipitado que se forma.

Adicionar, gota a gota, nitrato de prata a 10% até a solução ficar ligeiramente turva.

Deixar repousar durante a noite antes de utilizar.

 

Solução 3 – Solução de trabalho de nitrato de prata para Fontana Masson

Solução stock de nitrato de prata para Fontana Masson ……. 25 mL

Água destilada ……………………………….……………………………… 75 mL

Filtrar antes de utilizar.

 

Solução 4 – Solução stock de cloreto de ouro a 1%

Cloreto de ouro …………………………. 1 mL

Água destilada ………………………….. 99 mL

 

Solução 5 – Solução de trabalho de cloreto de ouro a 0,2%

Solução stock de cloreto de ouro a 1% ……. 10mL

Água destilada ……………….……………………. 40 mL

 

Solução 6 – Solução de tiossulfato (hipo) de sódio a 5%

Tiossulfato (hipo) de sódio …………. 5 g

Água destilada ………………..…………. 100 mL

 

Solução 7 – Solução nuclear fast red (kernechtrot)

Fast red nuclear (kernechtrot) …………………. 0.1 g

Solução de sulfato de alumínio a 5% …..…….. 100 mL

Aquecer devagar até a ferver. Arrefecer, filtrar e adicionar um grão de timol como conservante.

 

Procedimento técnico

 

1. Desparafinar e hidratar as lâminas até à água destilada
2. Colocar as lâminas na solução de trabalho de prata Fontana e deixar na estufa a 37ºC 60 min ou até o corte ficar castanho claro
3. Verificar as lâminas passados 45 minutos.Se as lâminas estiverem castanho claro, deixar fora da estufa durante 5 minutos.
4. Lavar em água destilada 3 x
5. Solução de trabalho de cloreto de ouro 10 min
6. Lavar em água destilada
7. Tiossulfato de sódio 5 min
8. Lavar em água destilada
9. Contrastar com solução de fast red 5 min
10. Lavar abundantemente em água
11. Desidratar e clarificar
12. Aplicar lamela com meio de montagem sintético

 

Resultados

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Referências bibliográficas
  1. Prophet, E.B. & Armed Forces Institute of Pathology, 1992. Laboratory Methods in Histotechnology. Washington, DC. American Registry of Pathology.