Van Gieson de acordo com Armed Forces Institute of Pathology: Laboratory Methods in Histotechnology
Reagentes e soluções
Nota: existem no mercado empresas que comercializam estas soluções já prontas a serem utilizadas, assim como kits de coloração completos.
Solução 1 – Solução stock de hematoxilina férrica de Weigert’s
Solução de stock A:
Hematoxilina ………………….……. 1 g
Álcool etílico a 95% ……….……… 100 mL
Solução de stock B:
Cloreto de ferro a 29% …………… 4 mL
Água destilada ………………..…….. 95 mL
Ácido hidroclorídrico ……………… 1 mL
Solução 2 – Solução de trabalho de hematoxilina férrica de Weigert’s
Misturar partes iguais da solução de stock A e B. Por exemplo:
Solução de stock A ………………. 10 mL
Solução de stock B ………………. 10 mL
A solução pode ser re-utilizada durante cerca de 2 semanas.
Solução 3 – Solução aquosa de fucsina ácida a 1 %
Fucsina ácida …………………….. 1 g
Água destilada …………..………. 100 mL
Solução 4 – Solução saturada de ácido pícrico
Ácido pícrico ……………………… 1.2 g
Água destilada …………………… 100 mL
Pesar com precisão o ácido pícrico para evitar fazer uma solução supersaturada.
Solução 5 – Solução de van Gieson
Fucsina ácida aquosa a 1% …………………… 5 mL
Solução saturada de ácido pícrico ………… 95 mL
Procedimento técnico
1 | Desparafinar e hidratar as lâminas até à água destilada | ||
2 | Corar com a solução de trabalho de hematoxilina de Weigert’s | 10 min | |
3 | Lavar em água destilada | ||
4 | Corar com a solução de van Gieson | 1-3 min | |
5 | Desidratar | Álcool etílico a 95% | 2 vezes 2 min |
Álcool etílico absoluto | 2 vezes 2 min | ||
Clarificar | Xilol | 2 vezes 2 min | |
6 | Montagem com meio de montagem resinoso |
Resultados
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Referências bibliográficas
- Prophet, E.B. & Armed Forces Institute of Pathology, 1992. Laboratory Methods in Histotechnology. Washington, DC. American Registry of Pathology.