Freida L. Carson

Autor: Ruben Gouveia. Ver página autores.
Última edição: Pathologika, 12 de Novembro de 2017
Citar esta página: Gouveia, R., Histoquímica. Fontana Masson – Pathologika. Available at: https://pathologika.com/histoquimica/fontana-masson/freida-l-carson/ [Acedido: data].

Fontana Masson de acordo com Histotechnology: a Self-Instructional Text


Reagentes e soluções

Nota: existem no mercado empresas que comercializam estas soluções já prontas a serem utilizadas, assim como kits de coloração completos.

Solução 1 – Nitrato de prata a 10%

Nitrato de prata …………………………………………… 10 g

Água destilada …………………………………………….. 100 mL

 

Solução 2 – Solução stock de nitrato de prata para Fontana Masson

Nitrato de prata a 10% ………………………………………… 25 mL

Adicionar, gota a gota, hidróxido de amoníaco concentrado até a solução ficar turva e depois incolor.

Adicionar, gota a gota, nitrato de prata a 10% até a solução ficar ligeiramente turva permanentemente.

Deixar repousar por várias horas.

 

Solução 3 – Solução de trabalho de nitrato de prata para Fontana Masson

Solução stock de nitrato de prata para Fontana Masson ……. 20 mL

Água destilada ……………………………….……………………………… 40 mL

Filtrar antes de utilizar.

 

Solução 4 – Solução stock de cloreto de ouro a 1%

Cloreto de ouro …………………………. 1 mL

Água destilada ………………………….. 99 mL

 

Solução 5 – Solução de trabalho de cloreto de ouro a 0,2%

Solução stock de cloreto de ouro a 1% ……. 10mL

Água destilada ……………….……………………. 40 mL

 

Solução 6 – Solução de tiossulfato de sódio a 5%

Tiossulfato de sódio ………………..…. 5 g

Água destilada ………………..…………. 100 mL

 

Solução 7 – Solução nuclear fast red (kernechtrot)

Fast red nuclear (kernechtrot) …………………. 0.5 g

Sulfato de alumínio ………………………..………. 25 g

Água destilada ………………………………………. 500 mL

Dissolver o sulfato de alumínio na água destilada e, de seguida, dissolver o fast red nuclear nesta solução utilizando calor. Arrefecer, filtrar e adicionar uns grãos de timol para preservar.

 

Procedimento técnico

 

1. Desparafinar e hidratar as lâminas até à água destilada
2. Colocar as lâminas na solução de nitrato de prata, em banho-maria a 56ºC 60min
3. Verificar as lâminas após uma hora e se for necessário deixar mais tempo no banho-maria.  As lâminas devem ser removidas quando ao microscópio os grânulos estiverem castanho escuro e não houver fundo
4. Solução de trabalho de cloreto de ouro [esta solução pode ser re-utilizada] 10min
5. Lavar em água destilada
6. Solução de tiossulfato de sódio 5 min
7. Lavar em água destilada
8. Contrastar com o fast red 5 min
9. Lavar em água corrente 1 min
10. Desidratar e clarificar
11. Aplicar lamela com meio de montagem sintético

Resultados

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Referências bibliográficas
  1. Carson, F.L., 1997. Histotechnology: a self-instructional text. 2ª ed., ASCP Press.