Fontana Masson de acordo com Histotechnology: a Self-Instructional Text
Reagentes e soluções
Nota: existem no mercado empresas que comercializam estas soluções já prontas a serem utilizadas, assim como kits de coloração completos.
Solução 1 – Nitrato de prata a 10%
Nitrato de prata …………………………………………… 10 g
Água destilada …………………………………………….. 100 mL
Solução 2 – Solução stock de nitrato de prata para Fontana Masson
Nitrato de prata a 10% ………………………………………… 25 mL
Adicionar, gota a gota, hidróxido de amoníaco concentrado até a solução ficar turva e depois incolor.
Adicionar, gota a gota, nitrato de prata a 10% até a solução ficar ligeiramente turva permanentemente.
Deixar repousar por várias horas.
Solução 3 – Solução de trabalho de nitrato de prata para Fontana Masson
Solução stock de nitrato de prata para Fontana Masson ……. 20 mL
Água destilada ……………………………….……………………………… 40 mL
Filtrar antes de utilizar.
Solução 4 – Solução stock de cloreto de ouro a 1%
Cloreto de ouro …………………………. 1 mL
Água destilada ………………………….. 99 mL
Solução 5 – Solução de trabalho de cloreto de ouro a 0,2%
Solução stock de cloreto de ouro a 1% ……. 10mL
Água destilada ……………….……………………. 40 mL
Solução 6 – Solução de tiossulfato de sódio a 5%
Tiossulfato de sódio ………………..…. 5 g
Água destilada ………………..…………. 100 mL
Solução 7 – Solução nuclear fast red (kernechtrot)
Fast red nuclear (kernechtrot) …………………. 0.5 g
Sulfato de alumínio ………………………..………. 25 g
Água destilada ………………………………………. 500 mL
Dissolver o sulfato de alumínio na água destilada e, de seguida, dissolver o fast red nuclear nesta solução utilizando calor. Arrefecer, filtrar e adicionar uns grãos de timol para preservar.
Procedimento técnico
| 1. | Desparafinar e hidratar as lâminas até à água destilada | |
| 2. | Colocar as lâminas na solução de nitrato de prata, em banho-maria a 56ºC | 60min |
| 3. | Verificar as lâminas após uma hora e se for necessário deixar mais tempo no banho-maria. As lâminas devem ser removidas quando ao microscópio os grânulos estiverem castanho escuro e não houver fundo | |
| 4. | Solução de trabalho de cloreto de ouro [esta solução pode ser re-utilizada] | 10min |
| 5. | Lavar em água destilada | |
| 6. | Solução de tiossulfato de sódio | 5 min |
| 7. | Lavar em água destilada | |
| 8. | Contrastar com o fast red | 5 min |
| 9. | Lavar em água corrente | 1 min |
| 10. | Desidratar e clarificar | |
| 11. | Aplicar lamela com meio de montagem sintético |
Resultados
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Referências bibliográficas
- Carson, F.L., 1997. Histotechnology: a self-instructional text. 2ª ed., ASCP Press.
